荧光定量PCR试剂盒在使用过程中可能会出现一些问题。以下是一些可能遇到的问题以及相应的解决方法:
1、污染
问题:试剂盒内部或外部受到污染,导致PCR反应失败。
解决方法:确保实验室操作区域清洁,并采取严格的无菌技术操作。同时,定期更换实验台面、手套和其他接触样品的器具。
2、非特异性扩增
问题:PCR产物不符合预期大小或存在多个非特异性产物。
解决方法:优化引物浓度和温度梯度,使用高质量纯化的DNA/RNA模板,并确认引物设计是否准确。
3、低灵敏度
问题:PCR信号弱,难以检测目标分子。
解决方法:优化放大条件、提高模板浓度、检查引物设计并考虑增加循环次数。
4、溶液沉淀
问题:试剂盒中出现沉淀或结晶。
解决方法:将溶液回温至适当温度并轻轻混匀直至溶解。
5、管道误差
问题:使用过程中由于管道误差导致添加体积不准确。
解决办法:确保使用精准可靠的移液器,并根据说明书正确地进行各种体积转移。
荧光定量PCR试剂盒
http://www.fsbio-e.com/SonList-1986119.html
https://www.chem17.com/st391834/erlist_1986119.html